Identyfikacja in vivo ujemnego elementu regulatorowego w mysim genie reninowym przy użyciu bezpośredniego transferu genu.

Mysz DBA / 2J zawiera dwa loci genu reninowego (Ren1d i Ren2d). Ren2d, ale nie Ren1d, jest wyrażany w gruczole podżuchwowym (SMG), podczas gdy oba są wyrażane w nerce. Na podstawie badań in vitro postulowaliśmy, że negatywny element regulatorowy (NRE) w promotorze genu reniny jest zaangażowany w jego specyficzną dla tkanki ekspresję. W tym badaniu zbadaliśmy mechanizm molekularny na poziomie in vivo przy użyciu bezpośredniego transferu genów. Fragmenty promotora Ren1d lub Ren2d zostały połączone z genem ekspresji genu acetylotransferazy chloramfenikolu (CAT). Te konstrukty skompleksowane w liposomach fuzogennych wstrzyknięto bezpośrednio do mysiego SMG lub do układu moczowego do nerki myszy poprzez tętnicę nerkową. Wektor zawierający CAT wykazywał łatwo wykrywalne ekspresje in vivo zarówno w SMG, jak i nerkach. W SMG fragment Ren1d zawierający NRE zniosł ekspresję CAT podczas delecji NRE przywróconego ekspresji CAT. Homologiczny fragment promotora Ren2d nie hamował ekspresji CAT, podczas gdy delecja wstawki o długości 150 pz powodowała hamowanie. Kotransfekcja konstruktu Ren1d z oligonukleotydami Ren1d-NRE jako wabiączka czynnika transkrypcyjnego przywracała ekspresję CAT. W przeciwieństwie do SMG, transfekcja konstruktem fragmentu CAT1 Ren1d lub konstruktem fragmentu CAT Ren2d do nerki spowodowała podobny poziom ekspresji CAT. Co ciekawe, ludzkie oligonukleotydy c-myc NRE, które mają homologię z Ren-d-NRE, współzawodniczyły skutecznie z tymi oligonukleotydami do regulacji ekspresji genu Ren1d in vivo. Ta sekwencja NRE jest również homologiczna do elementów tłumiących występujących w wielu genach ssaczych, co sugeruje obecność rodziny białek wiążących NRE / NRE regulujących ekspresję różnych genów.
[więcej w: dieta warzywno owocowa dr ewy dąbrowskiej, naturalne przyciemnianie włosów, profilaktyka chorób nowotworowych ]
[przypisy: profilaktyka chorób nowotworowych, zawroty głowy a menopauza, polanica zdrój uzdrowisko ]
[hasła pokrewne: badanie węzłów chłonnych, świeradów zdrój uzdrowisko, szpital kościuszki gliwice ]