Hamowanie aktywności antykoagulacyjnej białka S przez protrombinę.

Białko S jest zależnym od witaminy K kofaktorem białka do antykoagulantu, aktywowanego białka C (APC). W tym badaniu bada się hamowanie aktywności antykoagulantu ludzkiego białka S przez protrombinę. W nieobecności białka S aktywność przeciwzakrzepowa APC zmierzona w czasie odwapniania czynnika Xa była porównywalna przy użyciu normalnej lub osocza zaadsorbowanego z Al (OH) 3. Białko S było skutecznym kofaktorem dla APC w osoczu zaadsorbowanym na Al (OH) 3, ale było znacznie mniej aktywne w normalnym osoczu. Analiza różnicy w dwóch próbkach osocza wykazała, że normalne osocze zawierało inhibitor aktywności antykoagulacyjnej białka S, który został usunięty przez adsorpcję Al (OH) 3. Continue reading „Hamowanie aktywności antykoagulacyjnej białka S przez protrombinę.”

Oksydacyjnie zmodyfikowany LDL zawiera fosfolipidy o aktywności podobnej do czynnika płytkowego i stymuluje wzrost komórek mięśni gładkich.

Oksydacyjna modyfikacja lipoprotein jest uważana za ważną w genezie miażdżycy. Ustaliliśmy hodowle komórek mięśni gładkich (SMC) i poddaliśmy je działaniu natywnego LDL lub utlenionego LDL. Utleniony LDL, ale nie natywny LDL, był mitogenny, jak zmierzono przez włączenie [3H] -tymidyny do DNA. Efekt ten był zależny od stężenia, wynosił średnio 288% kontroli i był blokowany przez antagonistę receptora czynnika płytkowego (PAF). Postawiliśmy hipotezę, że fosfolipidy o aktywności podobnej do PAF powstały podczas utleniania LDL. Continue reading „Oksydacyjnie zmodyfikowany LDL zawiera fosfolipidy o aktywności podobnej do czynnika płytkowego i stymuluje wzrost komórek mięśni gładkich.”

Wpływ estrogenu na aktywność lipolityczną po heparynie. Selektywny spadek wątrobowej lipazy triglicerydowej.

Uważa się, że wzrost stężenia triglicerydów w osoczu (TG) związany z podawaniem estrogenu wynika z upośledzenia klirensu z powodu równomiernej supresji aktywności lipolitycznej po podaniu heparyny (PHLA). Ostatnio wykazano, że PHLA składa się z dwóch aktywności: wątrobowej lipazy TG i pozawątrobowej lipazy lipoproteinowej (LPL). Aby określić, czy estrogeny mogą indukować selektywny spadek jednej z tych czynności, zarówno wątrobową lipazę TG, jak i pozawątrobową LPL zmierzono w osoczu po heparynie od 13 normalnych kobiet przed i po 2 tygodniu leczenia etynyloestradiolem (1 kubek / kg na dzień ). Hepatyczną lipazę TG i pozawątrobową LPL oznaczono dwiema technikami: (a) rozdzielenie przez chromatografię na kolumnie z heparyną-Sepharose i (b) selektywne hamowanie specyficznymi przeciwciałami przeciwko wątrobowej lipazie wątrobowej TG i mlekiem LPL. Estrogen w równomierny sposób obniżał wątrobową lipazę TG, jak zmierzono w kolumnie powinowactwa (-68 +/- 12%, średnia +/- SD, P mniej niż 0,001) lub hamowanie przeciwciała (-63 +/- 11%, P mniej niż 0,001). Continue reading „Wpływ estrogenu na aktywność lipolityczną po heparynie. Selektywny spadek wątrobowej lipazy triglicerydowej.”

Interleukina 1 hamuje wydzielanie insuliny przez izolowane wysepki trzustkowe szczura w procesie, który wymaga transkrypcji genów i translacji mRNA.

Rekombinowana ludzka IL1 beta hamuje indukowane przez glukozę wydzielanie insuliny z izolowanych wysepek trzustkowych i oczyszczonych komórek beta otrzymanych przez aktywowane fluorescencyjnie sortowanie komórek (FACS) zdyspergowanych komórek wysp trzustkowych. Krótka (1 h) ekspozycja izolowanych wysepek na IL powoduje utrzymujące się hamowanie wydzielania insuliny przez co najmniej 17 godzin po usunięciu IL z pożywki hodowlanej. Hamującego wpływu IL na wydzielanie insuliny nie obserwuje się, gdy wysepki są koinkubowane z inhibitorem transkrypcji DNA (aktynomycyna D). To odkrycie wskazuje, że hamujący wpływ IL na wydzielanie insuliny wymaga transkrypcji jednego lub więcej genów podczas pierwszej godziny ekspozycji wysepek na IL 1. Hamujący wpływ IL na wydzielanie insuliny również wymaga translacji mRNA, ponieważ trzy różnią się strukturalnie. Continue reading „Interleukina 1 hamuje wydzielanie insuliny przez izolowane wysepki trzustkowe szczura w procesie, który wymaga transkrypcji genów i translacji mRNA.”

Wpływ wazopresyny i bradykininy na transport anionów przez kanalik zbiorczy szczura. Dowody na obrót elektroneutralny szlak transportu chlorku sodu.

Nasze wcześniejsze badania korowych przewodów gromadzących izolowanych z nerkowych szczurów wykazały, że wazopresyna zwiększa zarówno wchłanianie sodu, jak i wydzielanie potasu, podczas gdy bradykinina hamuje wchłanianie sodu bez wpływu na transport potasu. Aby określić, na które aniony te czynniki wpływają, perfundowaliśmy korowe przewody zbiorcze od szczurów leczonych deoksykortykosteronem i zmierzonym strumieniem chlorku netu, strumień wodorowęglanu netto (mierzony jako całkowity CO2), napięcie międzynabłonkowe i szybkość wchłaniania płynu. Argininowa wazopresyna (10 (-10) M w kąpieli okołokuchłonowej) spowodowała 6-krotny wzrost absorpcji chlorku netto i dwu- do trzykrotny wzrost wielkości ujemnego napięcia międzykanałowego światła. Przed dodaniem wazopresyny kanaliki wydzielały dwuwęglan. Wazopresyna znosiła wydzielanie wodorowęglanu, powodując absorpcję wodorowęglanu netto (prawdopodobnie z powodu wydzielania protonów) w wielu kanalikach. Continue reading „Wpływ wazopresyny i bradykininy na transport anionów przez kanalik zbiorczy szczura. Dowody na obrót elektroneutralny szlak transportu chlorku sodu.”

Cytoprotekcyjne działanie glicyny i glutationu na niedotlenienie kanalików nerkowych.

Role dla tripeptydu, GSH i poszczególnych aminokwasów w modyfikowaniu odpowiedzi komórkowej na uszkodzenie wywołane brakiem tlenu zostały zasugerowane przez wcześniejsze prace w nerkach i innych tkankach, ale precyzyjne wzajemne zależności nie zostały jednoznacznie określone. Badaliśmy wpływ GSH, jego składowych aminokwasów i powiązanych związków na zachowanie izolowanych kanalików proksymalnych nerki w dobrze scharakteryzowanym modelu niedotlenienia in vitro. GSH, połączenie cysteiny, glutaminianu i samej glicyny i glicyny, gdy były obecne w pożywce podczas 30-minutowego niedotlenienia, trwałość wystarczająca do wywołania rozległego nieodwracalnego uszkodzenia w nietraktowanych kanalikach, były ochronne. Znaczące efekty wykryto przy 0,25 mM stężeniu odczynników, a ochrona była prawie całkowita przy stężeniach mM i większych. Same glutaminian i cysteina nie były ochronne. Continue reading „Cytoprotekcyjne działanie glicyny i glutationu na niedotlenienie kanalików nerkowych.”

Ekspresja receptorów AT2 w rozwijającym się płodzie płodowym.

Angiotensyna II jest znana przede wszystkim ze względu na jej wpływ na ciśnienie krwi i homeostazę elektrolitową, ale ostatnie badania sugerują, że angiotensyna II może odgrywać rolę w regulacji wzrostu komórkowego. Badanie to podjęto w celu zidentyfikowania podtypów receptora angiotensyny II wyrażanych podczas rozwoju płodu i noworodka oraz scharakteryzowania ich lokalizacji komórkowej. Stosując test wiązania receptora in situ na strzałych, zamrożonych skrawkach szczurów płodowych i noworodkowych, wiązano 125I- [Sarl, Ile8] -angiotensynę II wizualizowano autoradiografią filmową i emulsyjną. Związany radioligand został wykryty przez E11 (zarodkowy dzień 11), a maksymalne wiązanie nastąpiło w E19-21. Wiązanie radioliganda pozostało niezmienione 30 minut po urodzeniu, natomiast wyraźny i stabilny spadek obserwowano 12 godzin po porodzie. Continue reading „Ekspresja receptorów AT2 w rozwijającym się płodzie płodowym.”

Tłumienie mysiego zapalenia nerek NZB / NZW przez podanie syngenicznego przeciwciała monoklonalnego przeciwko DNA. Możliwa rola przeciwciał antyidiotypowych.

Zahamowanie krążących przeciwciał przeciw dwuniciowemu DNA osiągnięto u samic myszy NZB / NZW f1 przez wielokrotne podawanie monoklonalnego przeciwciała IgG2a do DNA. Zgony z zapaleniem nerek były opóźnione; Odkładanie kłębuszkowe IgG i kationowych przeciwciał IgG DNA charakterystycznych dla mysiego toczniowego zapalenia nerek uległo zmniejszeniu. Ilości krążących przeciwciał przeciwko jednoniciowemu DNA nie były zmniejszone w porównaniu z myszami kontrolnymi nieleczonymi lub leczonymi IgG szpiczakiem IgG. Przeciwciała skierowane przeciw monoklonalnemu anty-DNA pojawiły się w krążeniu leczonych myszy po trzech inokulacjach idiotypu. Te przeciwciała nie reagowały z innym monoklonalnym anty-DNA tego samego allotypu. Continue reading „Tłumienie mysiego zapalenia nerek NZB / NZW przez podanie syngenicznego przeciwciała monoklonalnego przeciwko DNA. Możliwa rola przeciwciał antyidiotypowych.”

Podstawowy obrót fosfatydyloinozytolu kontroluje aktywność ATPazy Na + / K + aorty.

Aby ustalić, czy podstawowy obrót fosfoinozytydu odgrywa rolę w regulacji metabolicznej w spoczynkowym łożysku króliczym, a następnie w inkubowanych warunkach stacjonarnych, użyliśmy pozbawienia zewnątrzkomórkowego mio-inozytolu jako potencjalnego środka do hamowania podstawowej syntezy fosfatydyloinozytolu (PI) w ograniczonych miejscach i zubożenie małych pul fosfoinozytydów z szybkim podstawowym obrotem. Średni mioinozytol w prawidłowym stężeniu w osoczu był wymagany do zapobiegania hamowaniu specyficznego składnika podstawowej syntezy PI de novo, co jest konieczne do wykazania dyskretnej, szybko rotującej puli PI [1,3-14C] znakowanej glicerolem. Średni mio-inozytol był również wymagany do znakowania dyskretnej puli PI za pomocą [1-14C] kwasu arachidonowego (AA). Szybki podstawowy obrót tej puli PI, gdy oznaczono ją glicerolem lub AA, nie wynikał z jej wykorzystania do tworzenia polifosfozytydu i wydaje się odzwierciedlać podstawową hydrolizę PI. Zubażanie endogennej wolnej AA w średnio odtłuszczonej albuminie selektywnie hamuje składnik podstawowej syntezy PI de novo, który uzupełnia szybko pulę PI zwrotnego. Continue reading „Podstawowy obrót fosfatydyloinozytolu kontroluje aktywność ATPazy Na + / K + aorty.”

Regulacja lipazy lipoproteinowej mięśni i tkanki tłuszczowej u biegaczy poprzez odwodzenie.

Aby zbadać mechanizm regulacji lipazy lipoproteinowej (LPL) w trakcie ćwiczeń, zrekrutowaliśmy 16 zdrowych sportowców, aby poddali się 2-tygodniowemu okresowi wytrenowania. Biopsje tkanki tłuszczowej i biustu na czczo wykonano zarówno przed, jak i po okresie wyciskania. W mięśniach osłabienie spowodowało spadek aktywności LPL zarówno w frakcjach uwalniających heparynę (HR) (-45%, P <0,05) i komórkowej (frakcje ekstrahowalne [EXT]) (-75%, P <0,005), bez frakcji. znaczące zmiany w wartościach immunoreaktywnych LPL i poziomach mRNA. Jednak kilku pacjentów wykazało równoległe spadki masy LPL i poziomów mRNA przy wyciąganiu, co sugeruje, że istnieje pewien stopień niejednorodności w odpowiedzi. Continue reading „Regulacja lipazy lipoproteinowej mięśni i tkanki tłuszczowej u biegaczy poprzez odwodzenie.”