Rola tachykardii jako bodźca inotropowego u człowieka

Badaliśmy inotropowy efekt tachykardii u dziewięciu chorych po zabiegu pomostowania aortalno-aortalno-wieńcowego (z nienaruszonym unerwieniem serca) i dziewięciu biorców przeszczepu serca (z odnerwionymi sercami). Zmiany objętości udaru (SV) i prędkości obwodowego skracania włókien (VCF), które towarzyszą gwałtownym wzrostom i spadkom częstotliwości stymulacji przedsionkowej, zostały określone za pomocą komputerowej analizy fluoroskopowej ruchu chirurgicznie wszczepionych markerów miokardialnych ściany środkowej. Ponieważ pierwsze uderzenie po zmianie częstości zachowuje charakterystykę częstotliwości poprzedniej prędkości, porównaliśmy pierwszy rytm posttachykardii z rytmem kontrolnym i rytmem późnej tachykardii z pierwszym rytmem tachykardii; ładowanie i wstępne ładowanie dla każdej pary bitów było podobne. Aby zwiększyć częstość akcji serca o 50 uderzeń / min, SV i VCF wzrosły o 79% i 64% z pierwszych uderzeń tachykardii do późnych częstoskurczów tachykardowych, a SV i VCF wzrosły o 8 i 35% z uderzeń kontrolnych do pierwszego rytmu poobrażeniowego w unerwionym Grupa. Odpowiedzi w odrodzonej grupie nie różniły się istotnie od tych w grupie unerwionej. Continue reading „Rola tachykardii jako bodźca inotropowego u człowieka”

Podstawowy obrót fosfatydyloinozytolu kontroluje aktywność ATPazy Na + / K + aorty.

Aby ustalić, czy podstawowy obrót fosfoinozytydu odgrywa rolę w regulacji metabolicznej w spoczynkowym łożysku króliczym, a następnie w inkubowanych warunkach stacjonarnych, użyliśmy pozbawienia zewnątrzkomórkowego mio-inozytolu jako potencjalnego środka do hamowania podstawowej syntezy fosfatydyloinozytolu (PI) w ograniczonych miejscach i zubożenie małych pul fosfoinozytydów z szybkim podstawowym obrotem. Średni mioinozytol w prawidłowym stężeniu w osoczu był wymagany do zapobiegania hamowaniu specyficznego składnika podstawowej syntezy PI de novo, co jest konieczne do wykazania dyskretnej, szybko rotującej puli PI [1,3-14C] znakowanej glicerolem. Średni mio-inozytol był również wymagany do znakowania dyskretnej puli PI za pomocą [1-14C] kwasu arachidonowego (AA). Szybki podstawowy obrót tej puli PI, gdy oznaczono ją glicerolem lub AA, nie wynikał z jej wykorzystania do tworzenia polifosfozytydu i wydaje się odzwierciedlać podstawową hydrolizę PI. Zubażanie endogennej wolnej AA w średnio odtłuszczonej albuminie selektywnie hamuje składnik podstawowej syntezy PI de novo, który uzupełnia szybko pulę PI zwrotnego. Continue reading „Podstawowy obrót fosfatydyloinozytolu kontroluje aktywność ATPazy Na + / K + aorty.”

Receptor cytoplazmatyczny dla glukokortykoidów w płucach płodu ludzkiego i noworodka.

U zwierząt płodowych, glikokortykosteroidy przyspieszają rozwój płuc i powodują przedwczesne pojawienie się pęcherzykowego środka powierzchniowo czynnego. Aby stwierdzić, czy płuco ludzkie może również reagować na kortykosteroidy, zbadaliśmy płuca ludzkiego płodu i noworodka zarówno pod względem wiązania cytoplazmatycznego, jak i wychwytu nukleotydowego glukokortykoidów. W odcinkach płodowego płuca inkubowanych z [3H] deksametazonem w 2 ° C, specyficzne wiązanie makromolekularne występuje głównie w frakcji cytoplazmatycznej . Po dalszej inkubacji w temperaturze 37 ° C prawie 75% radioaktywności znajduje się w frakcji jądrowej o stężeniu 0,3 pmol / mg DNA przy pozornym nasyceniu deksametazonem (47 nM). Receptor cytoplazmatyczny wiąże deksametazon in vitro z wysokim powinowactwem (stała dysocjacji = 8,9 nM), a powinowactwo różnych innych steroidów koreluje z ich mocą glukokortykoidową. Continue reading „Receptor cytoplazmatyczny dla glukokortykoidów w płucach płodu ludzkiego i noworodka.”

Mechanizm toksyczności dezoksyadenozyny i 2-chlorodeoksyadenozyny w niedostępnych limfocytach ludzkich.

Dezoksyadenozyna jest uważana za toksyczny metabolit powodujący głęboką limfopenię u dzieci z niedoborem odporności z genetycznym niedoborem deaminazy adenozyny (ADA) oraz u dorosłych leczonych silnym inhibitorem ADA, deoksycoformycyny. Jednak biochemiczna podstawa toksyczności dezoksyadenozyny względem limfocytów pozostaje kontrowersyjna. W niniejszych doświadczeniach szczegółowo zbadano sekwencyjne zmiany metaboliczne indukowane w niedostępnych ludzkich limfocytach krwi obwodowej przez inkubację z deoksyadenozyną plus deoksykoformycyną lub 2-chlorodeoksyadenozyną (CdA), opornym na ADA kongenererem dezoksyadenozyny o właściwościach anty-białaczkowych i immunosupresyjnych. Leptotoksyczne działanie deoksyadenozyny i CdA wymagało ich fosforylacji i było hamowane przez deoksycytynę. Już w 4 godziny po ekspozycji na deoksynukleozydy, pęknięcia nici w DNA limfocytów zaczęły się akumulować, a synteza RNA uległa zmniejszeniu. Continue reading „Mechanizm toksyczności dezoksyadenozyny i 2-chlorodeoksyadenozyny w niedostępnych limfocytach ludzkich.”

Różnice etniczne polimorfizmu genu VH3 immunoglobuliny.

Gen linii płciowej VH26 zajmuje dwa różne loci, z powodu duplikacji genów i jest jednym z najczęściej wyrażanych genów VH ludzkiej immunoglobuliny. Raport ten identyfikuje allele każdego locus VH26 i opisuje różne wzorce polimorfizmu VH26 w trzech grupach etnicznych. Sondy oligonukleotydowe celujące w VH26 zastosowano w analizie RFLP specyficznej dla sekwencji DNA od 72 rasy kaukaskiej, 52 Azjatów, 35 amerykańskich Murzynów i członków sześciu rodzin. Locus A, w paśmie TaqI o masie 7,0 kb wykryto u 89% osób rasy kaukaskiej, 75% Azjatów i 26% czarnych (chi2 = P <0,0005). Odkryto, że locus B wykryty w paśmie 5,0 kb u niemal wszystkich osobników ma dodatkowe allele występujące przy 6,8 kb u 10% Azjatów i 3% u czarnych (chi2 = 7,8, P <0,02) i przy 3,7 kb w 1,4% rasy kaukaskiej, 21% Azjatów i (9% czarnych (chi2 = 13,8, P <0,001). Continue reading „Różnice etniczne polimorfizmu genu VH3 immunoglobuliny.”

Przeciwciało monoklonalne do domeny karboksyterminalnej prokolagenu typu I wizualizuje fibroblasty syntetyzujące kolagen. Wykrywanie zmienionego fenotypu fibroblastów w płucach pacjentów ze zwłóknieniem płuc.

Nadmierne odkładanie kolagenu odgrywa kluczową rolę w rozwoju zwłóknienia, a wczesne lub aktywne zwłóknienie może być bardziej podatne na interwencję terapeutyczną niż późniejsze etapy powstawania blizn. Jednakże obecnie nie ma prostej metody oceny aktywności syntezy kolagenu i sekrecji fibroblastów w tkankach ludzkich. Karboksyterminalne domeny prokolonu typu I są usuwane proteolitycznie podczas wydzielania kolagenu. W związku z tym przeciwciała przeciwko tym domenom powinny zabarwić fibroblasty syntetyzujące kolagen typu I, ale nie pozakomórkowe włókienka kolagenowe, które mogłyby maskować sygnał z komórek. Opracowaliśmy i scharakteryzowaliśmy przeciwciało monoklonalne (Anti-pC) specyficzne dla karboksyterminalnego propeptydu prokolagenu typu I. Continue reading „Przeciwciało monoklonalne do domeny karboksyterminalnej prokolagenu typu I wizualizuje fibroblasty syntetyzujące kolagen. Wykrywanie zmienionego fenotypu fibroblastów w płucach pacjentów ze zwłóknieniem płuc.”

Synteza transferryny przez drobnokomórkowe komórki raka płuca działa jako autokrynny regulator proliferacji komórkowej.

Ponieważ transferyna jest niezbędna do proliferacji komórkowej, badaliśmy syntezę transferryny przez linię komórek drobnokomórkowego raka płuc (NCI-H510), która przeżywa w pożywce bez surowicy bez dodatku transferyny. Testy immunologiczne dla ludzkiej transferryny wykazały, że te komórki zawierają immunoreaktywną ludzką transferynę. Badania immunofluorescencji wykazały, że białko ulega ekspresji na powierzchni komórek, przypuszczalnie wiąże się z receptorem transferyny. Pożywki kondycjonowane przez komórki NCI-H510 wspierają proliferację ludzkich komórek białaczkowych, które nie przeżyłyby w mediach bez transferyny. [35S] Wbudowana metionina dokumentacja syntezy transferryny przez komórki NCI-H510, a także trzy inne małe linie komórkowe. Continue reading „Synteza transferryny przez drobnokomórkowe komórki raka płuca działa jako autokrynny regulator proliferacji komórkowej.”

Przewlekła hiperglikemia jest związana z upośledzonym wpływem glukozy na wydzielanie insuliny. Badanie na normalnych szczurach z zastosowaniem przewlekłych infuzji glukozy in vivo.

Zaproponowaliśmy, aby przewlekła hiperglikemia zmieniała zdolność glukozy do modulowania wydzielania insuliny, i teraz badali wpływ różnych poziomów hiperglikemii na funkcjonowanie komórek B u normalnych szczurów, stosując przewlekłe infuzje glukozy. Szczurom o masie 220-300 g podawano wlew 0,45% NaCl lub 20, 30, 35 lub 50% glukozy w dawce 2 ml / h przez 48 godzin, co zwiększało poziom glukozy w osoczu o 18 mg / dl dla 30% szczurów, 37 mg / dl u 35% szczurów i 224 mg / dl w grupie 50%. Następnie badano wydzielanie insuliny przy użyciu izolowanej perfuzji trzustki in vitro. Wydzielanie insuliny indukowane glukozą pozostawało nienaruszone w normoglikemicznych szczurach z 20% glukozą i było nasilone u szczurów z łagodną hiperglikemią i 30% glukozą. Jednakże, przy jeszcze większej hiperglikemii w grupie 35% glukozy, odpowiedź insulinowa na wysoki perfuzat glukozy była poważnie stępiona i została całkowicie utracona u większości hiperglikemicznych szczurów z 50% glukozą. Continue reading „Przewlekła hiperglikemia jest związana z upośledzonym wpływem glukozy na wydzielanie insuliny. Badanie na normalnych szczurach z zastosowaniem przewlekłych infuzji glukozy in vivo.”

Stymulacja cGMP monocytów przez dializaty leukocytów. Właściwość niezależnego od antygenu dializowanego czynnika transferu.

Zbadaliśmy wpływ dializatów na lizaty leukocytów zawierające dializowalną aktywność czynnika transferowego i inne dializaty leukocytów pozbawione aktywności czynnika transferu na akumulację cyklicznych nukleotydów w ludzkich leukocytach. Dializaty z normalnych leukocytów wytwarzały 4- do 11-krotny wzrost cGMP leukocytów, a eksperymenty z oczyszczonymi populacjami komórek ujawniły, że wzrosty były głównie, jeśli nie całkowicie, w monocytach krwi. Substancje, które zwiększyły cGMP monocytów można uzyskać z kilku populacji komórek, w tym komórek jednojądrzastych z gradientów Hypaque-Ficoll, monocytów przylegających do plastra, nieprzylegających limfocytów i neutrofili, ale nie były obecne w dializatach limfocytów białaczkowych od pacjentów z zespołem Sezary ego. Co więcej, dializaty, które zwiększały cGMP leukocytów, zasadniczo nie miały wpływu na wewnątrzkomórkowy cAMP. Dializaty zlizowanych komórek jednojądrzastych zawierały serotoninę, askorbinian i niezidentyfikowaną aktywność cholinergiczną, środki zwiększające cGMP leukocytów. Continue reading „Stymulacja cGMP monocytów przez dializaty leukocytów. Właściwość niezależnego od antygenu dializowanego czynnika transferu.”

Badania nad toksynogenezą w Vibrio cholerae. III. Charakterystyka mutantów nietoksynogennych in vitro i zwierząt doświadczalnych.

Spontaniczne i chemicznie indukowane mutanty o obniżonej zdolności do wytwarzania enterotoksyny cholery (choleragen) jako białka pozakomórkowego wyizolowano ze szczepów Vibrio cholerae 569B Inaba, klasycznego wirusa cholery i 3083-2 Ogawa, El Vibrio. Dzięki jakościowemu i ilościowemu testowi immunologicznemu in vitro takie mutanty można było rozdzielić na różne klasy charakteryzujące się albo wytwarzaniem niewykrywalnego choleragenu (toksycznego minus), albo niewielkich ilości pozakomórkowego choleragenu, albo dużych ilości związanego z komórką cholestagenem, ale niewielkim zewnątrzkomórkowym choleragenem. . Analiza białek w stężonych supernatantach hodowli za pomocą elektroforezy w żelach poliakrylamidowych wykazała, że w hodowlach z toksycznie ujemnych szczepów brakowało białek z ruchliwością elektroforetyczną odpowiadających choleragenowi lub spontanicznie utworzonym toksoidom (choleragenoid). Noworodki królików zakażonych szczepami toks-ujemnymi pozostawały bezobjawowe lub miały łagodniejsze objawy niż króliki zakażone szczepami toksycznymi + rodzicielskimi. Continue reading „Badania nad toksynogenezą w Vibrio cholerae. III. Charakterystyka mutantów nietoksynogennych in vitro i zwierząt doświadczalnych.”