Interakcja monocytów z współhodowlami komórek ściany aorty ludzkiej obejmuje interleukiny 1 i 6 z wyraźnym wzrostem sygnału koneksyny43.

Pożywka z współhodowli ludzkich komórek śródbłonka aorty (HAEC) i komórek mięśni gładkich (HASMC) pobranych od tego samego dawcy zawierała około dwa do czterech razy więcej czynnika stymulującego kolonię makrofagów, czynnik stymulujący kolonię granulocytów / makrofagów i do 5,1 razy więcej transformującego czynnika wzrostu beta, niż można by przypisać sumowaniu aktywności pożywek z równoważnej liczby HAEC i HASMC hodowanych osobno. Po znakowaniu impulsowym stwierdzono, że immunoprecypitowane [35S] fibronektyny i [14C] kolagenu są znacznie zwiększone w kulturach kohaktycznych w porównaniu z hodowlą HAEC i HASMC oddzielnie. Współdziałanie HAEC i HASMC skutkowało 2,7-krotnym wzrostem poziomu informacyjnego RNA koneksyny43. Gdy bezpośredni kontakt fizyczny między HAEC i HASMC został uniemożliwiony przez membranę, która była przepuszczalna dla pożywki, poziomy [35S] fibronektyny i [14C] kolagenu w kokulturze były znacznie zmniejszone. Monocyty hodowane same zawierały niski poziom [35S] fibronektyny i [14C] kolagenu, ale po dodaniu do kokultury dochodziło do 22-krotnego wzrostu [35S] fibronektyny i 1,9-krotnego wzrostu kolagenu [14C] w porównaniu do tylko sama kokultura. Continue reading „Interakcja monocytów z współhodowlami komórek ściany aorty ludzkiej obejmuje interleukiny 1 i 6 z wyraźnym wzrostem sygnału koneksyny43.”

Wpływ immunoterapii pyłkowej traw na przenikanie komórek i ekspresję mRNA cytokin podczas indukowanych alergenem późnych faz odpowiedzi skórnych.

Badaliśmy wpływ immunoterapii pyłkowej traw na infiltrację komórek i ekspresję mRNA cytokin podczas indukowanych alergenem późnych odpowiedzi skórnych. W podwójnie ślepym, kontrolowanym placebo badaniu immunoterapii u 40 dorosłych osób cierpiących na katar sienny, poprawie klinicznej towarzyszyło zmniejszenie wielkości późnej fazy reakcji skórnej. Gdy grupa leczona immunoterapią była porównywana z grupą placebo, analiza biopsji skóry uzyskanych 24 godziny po śródskórnym alergenie wykazała znaczące zmniejszenie liczby komórek infiltrujących CD3 + (P = 0,04) i CD4 + (P = 0,009) oraz tendencję do zmniejszenie liczby eozynofilów EG2 + (P = 0,08). Leczenie nie wpłynęło na indukowaną alergenem rekrutację komórek CD8 +, neutrofili lub makrofagów. Nieoczekiwany wzrost ekspresji CD25 (P = 0,006) i HLA-DR (P = 0,007) obserwowano w aktywnie leczonej grupie. Continue reading „Wpływ immunoterapii pyłkowej traw na przenikanie komórek i ekspresję mRNA cytokin podczas indukowanych alergenem późnych faz odpowiedzi skórnych.”

Wtrętowa peroksydacja lipidów in vivo u szczurów z chronicznym przeciążeniem żelazem.

Peroksydacyjny rozkład lipidów błony komórkowej jest postulowanym mechanizmem uszkodzenia hepatocytów w przeciążeniu żelazem miąższowym. W niniejszym badaniu poszukiwaliśmy bezpośredniego dowodu peroksydacji lipidów in vivo (mierzonego przez tworzenie dienów sprzężonych z lipidami w wątrobowych błonach organelli) od szczurów z doświadczalnym przewlekłym obciążeniem żelazem. Zarówno pozajelitowe podawanie nitrylotrioctanu żelazowego (FeNTA), jak i suplementację diety karbonylową żelazem zastosowano do wytworzenia przewlekłego nadmiaru żelaza. Biochemiczna i histologiczna ocena tkanki wątroby potwierdziła umiarkowany wzrost zawartości żelaza w wątrobie. Podawanie FeNTA powodowało nadmierne odkładanie żelaza w wątrobowym zraziku zarówno w hepatocytach, jak iw komórkach Kupffera, podczas gdy suplementacja diety karbonylkiem żelaza powodowała większe przeciążenie żelazem wątrobowym w periportalnej dystrybucji z odkładaniem żelaza głównie w hepatocytach. Continue reading „Wtrętowa peroksydacja lipidów in vivo u szczurów z chronicznym przeciążeniem żelazem.”

Modulacja wpływu antyproliferacyjnego czynnika transformującego beta-1 na komórki śródbłonka przez cysteinę, cystynę i N-acetylocysteinę.

Komórki śródbłonka płucnej tętnicy płucnej z wczesnym pasażem poddane działaniu 0,1-2,0 ng / ml transformującego czynnika wzrostu-beta (TGF-beta 1) wykazywały zależne od stężenia hamowanie wzrostu, co oceniono na podstawie znakowania [3H] tymidyny i liczby komórek, w h interwał. Większość hamowania znakowania [3H] tymidyny zmierzona po 96 godz. Utrzymywała się, gdy pożywkę zastąpiono pożywką wolną od TGF-beta po 24 godzinach, ale hamowaniu znakowania zapobiegało obecność przeciwciała anty-TGF-beta w medium zastępczym. Dodatki 2 mM cysteiny, mM cystyny lub 2 mM N-acetylocysteiny w czasie początkowego dodawania TGF-beta blokowały hamujący wpływ TGF-beta na znakowanie [3H] -tymidyny, gdy oceniano to po 72 -96 h, ale nie wcześniej. Zapobieganie hamującemu wpływowi proliferacji komórkowej wytwarzanej przez cysteinę, cystynę i N-acetylocysteinę było związane z podniesieniem komórkowego glutationu, który był obecny w 48-96 godz. Continue reading „Modulacja wpływu antyproliferacyjnego czynnika transformującego beta-1 na komórki śródbłonka przez cysteinę, cystynę i N-acetylocysteinę.”

Wykazanie makrocząsteczkowego (-ych) inhibitora (-ów) zwapnienia i czynnika (-ów) nuklearnego (-ych) w płynie z miejsc zwapniających w chrząstce

Zewnątrzkomórkowa faza płynna (Cf1), zasysana za pomocą technik mikropunkturowych z hipertroficznej strefy komórkowej wapniejącego nasady rzęskowej, została scharakteryzowana w układzie wapnienia in vitro w odniesieniu do zachowania sedymentacji i frakcji supernatantu po ultrawirowaniu przy dużej prędkości. Aby wykonać te testy na początkowych próbkach 20 nl Cf1, makroskopowe metody analityczne zostały zmniejszone w celu identyfikacji odpowiednich składników organicznych, w tym kwasu heksuronowego i proteinopoliacharydów (PPL). System akrecji mineralnej został opracowany w celu symulowania warunków fizjologicznych w zwapniałych przegrodach chrząstki prawidłowych szczurów, a minerałem stosowanym do zaszczepienia był niedojrzały fosforan wapnia podobny do naturalnego minerału chrząstki. Normalny Cf1 lub jego rozcieńczenia w syntetycznych limfach do 1: 4 całkowicie zapobiegły akrecji mineralnej in vitro. Działanie hamujące zostało zlokalizowane na osadzonych frakcjach po ultrawirowaniu i mogło zostać zniszczone przez inkubację z trypsyną lub hialuronidazą. Continue reading „Wykazanie makrocząsteczkowego (-ych) inhibitora (-ów) zwapnienia i czynnika (-ów) nuklearnego (-ych) w płynie z miejsc zwapniających w chrząstce”

Brak ekspresji aminoacylazy-1 w drobnokomórkowym raku płuca. Dowody na inaktywację genów kodowanych przez chromosom 3p.

Delecja z udziałem chromosomu 3p (14-23) charakterystycznie występuje w drobnokomórkowym raku płuca (SCLC). Redukcja do homozygotyczności, a nie całkowita utrata, jest typowo obserwowana dla genów w usuniętym regionie. Brak ekspresji genów kodowanych przez ten region, co oznacza dezaktywację wszystkich alleli, nie został wcześniej opisany. Zbadaliśmy ekspresję aminoacylazy-1 (ACY-1), kodowanej przez chromosom 3p21, przy użyciu zarówno testu aktywności elektroforetycznej, jak i testu ELISA opartego na przeciwciałach monoklonalnych. Różne tkanki ludzkie, w tym płuca, mózg, wątroba, nerki, serce, rdzeń nadnerczy i erytrocyty były uprzednio badane pod kątem aktywności ACY-1 i antygenu; wszystkie oprócz erytrocytów są pozytywne. Continue reading „Brak ekspresji aminoacylazy-1 w drobnokomórkowym raku płuca. Dowody na inaktywację genów kodowanych przez chromosom 3p.”

Glukoza i trijodotyronina indukują enzym jabłkowy w hodowli hepatocytów szczura: dowód, że trijodotyronina zwielokrotnia pierwotny sygnał generowany przez glukozę.

W stymulowanym układzie hepatocytów stymulowaliśmy synergiczne oddziaływanie między trójjodotyroniną (T3) a węglowodanem dietetycznym w indukcji enzymu jabłkowego (ME). Badania kinetyczne wykazały, że izolowane hepatocyty równoważą się z pożywką T3 w ciągu 5 minut; jądra równoważą się z pożywką T3 przez 45 minut; a połowiczny czas metabolizmu T3 wynosił 10 godzin w 10% surowicy. Pokazaliśmy jądrowe receptory T3 w izolowanych hepatocytach i indukcję ME przez T3 w stężeniach fizjologicznych. Jednak przy całkowitym braku T3 glukoza może nadal wywoływać ME. Przy wszystkich stężeniach glukozy (100-1000 mg / dl), T3 (0,3 nM wolnego T3) powodowało względnie stały (1,4- do 1,7-krotny) wzrost odpowiedzi ME. Continue reading „Glukoza i trijodotyronina indukują enzym jabłkowy w hodowli hepatocytów szczura: dowód, że trijodotyronina zwielokrotnia pierwotny sygnał generowany przez glukozę.”

Kontrola neuronalna zwieracza Oddiego. Fizjologiczna rola 5-hydroksytryptaminy w regulacji podstawowego zwieracza aktywności motorycznej Oddiego u kota.

Badano wpływ 5-hydroksytryptaminy (5-HT) na zwieracz Oddi (SO) u kota. Wirus miał dwie reakcje motoryczne na 5-HT: najczęstszym był początkowy skurcz, po którym następował dłuższy czas relaksacji, a drugi był ekskluzywnym odprężeniem. Tetrodotoksyna nie osłabiała wielkości skurczu sieci indukowanej przez 5-HT, ale całkowicie blokowała relaksację. Metysergid częściowo hamował skurcz SO w odpowiedzi na submaksymalne dawki 5-HT (5-20 mikrogramów / kg). Atropina zmniejszyła odpowiedź ekscytacyjną SO na wszystkie dawki 5-HT. Continue reading „Kontrola neuronalna zwieracza Oddiego. Fizjologiczna rola 5-hydroksytryptaminy w regulacji podstawowego zwieracza aktywności motorycznej Oddiego u kota.”

Hamowanie odkładania kolagenu w macierzy pozakomórkowej zapobiega tworzeniu zrąb wspomagających hematopoezę w długotrwałych hodowlach szpiku kostnego myszy.

Długoterminowa produkcja mysich komórek krwiotwórczych in vitro zależy od ustalenia złożonego mikrośrodowiska składającego się z różnych komórek zrębowych i rozległej macierzy pozakomórkowej, która obejmuje kolagen, fibronektynę, lamininę, proteoglikany i inne niezdefiniowane składniki przylegające do płytek hodowlanych. Cis-4-hydroksyprolinę (CHP), względnie specyficzny inhibitor wydzielania kolagenu, zastosowano do zbadania roli pozakomórkowego odkładania kolagenu we wspomaganiu hematopoezy w długotrwałych hodowlach komórek szpiku kostnego myszy C57B1 / 6J. Przez cały 10-tygodniowy okres hodowli wszystkie naczynia hodowlane zawierały 0, 10, 25 lub 50 mikrogramów / ml CHP. Wszystkie komórki średnie i nieprzylegające były usuwane w tygodniowych odstępach i zastępowane świeżą pożywką zawierającą wcześniejsze stężenia CHP. Komórki nieadherentne badano co tydzień dla komórek całkowitych i komórek progenitorowych pluripotencjalnych, erytroidalnych, megakariocytarnych i granulocytowo-makrofagowych. Continue reading „Hamowanie odkładania kolagenu w macierzy pozakomórkowej zapobiega tworzeniu zrąb wspomagających hematopoezę w długotrwałych hodowlach szpiku kostnego myszy.”