Neutrofile w układowej patogenezie tocznia rumieniowatego

Znalezione

Cele

Uwalnianie zewnątrzkomórkowych neutrofili (NET) stanowi nową funkcję efektorów neutrofili w układowej patogenezie tocznia rumieniowatego (SLE). Jednak mechanizm molekularny leżący u podstaw uwolnienia NET i sposób, w jaki NET pośredniczy w uszkodzeniu narządu końcowego w SLE, pozostaje nieuchwytny.

Metody

Tworzenie NET i związane z NET białka oceniano we krwi obwodowej i biopsjach z tarczowatego tocznia i proliferacyjnego zapalenia nerek, stosując immunofluorescencję, immunoblotting, ilościową PCR i ELISA. Autofagię oceniano za pomocą immunofluorescencji i immunoblottingu. Funkcjonalne działanie NETs in vitro oceniono w hodowli pierwotnej fibroblastów.
[patrz też: endoksan, regutherm, obieg chłodniczy ]
[hasła pokrewne: endoksan, regutherm, obieg chłodniczy ]

Mikrośrodowisko hematopoetyczne. Geneza, linia i przeszczepialność komórek zrębu w długoterminowych hodowlach szpiku kostnego od myszy chimerycznych.

Badania pacjentów po przeszczepieniu szpiku kostnego sugerują, że komórki zrębowe mikrośrodowiska krwiotwórczego in vitro można przeszczepiać warunkowym biorcom. Ponadto wydaje się, że u pacjentów z zaburzeniami mieloproliferacyjnymi wszystkie komórki zrębu, do których należą przypuszczalne komórki śródbłonka, pochodzą od prekursorów hematopoetycznych. Aby potwierdzić te odkrycia, skonstruowaliśmy dwa chimeryczne modele myszy: (a) tradycyjne chimery promieniowania i (b) chimery płodu, wytwarzane przez łożyskowe wstrzyknięcie szpiku kostnego genetycznie anemicznym płodom Wx / Wv, technika, która zasadniczo uniemożliwia wszczepienie niehematopoetycznych komórki. Stosując dwukolorową immunofluorescencję pośrednią, komórki zrębowe w długotrwałej hodowli szpiku kostnego pochodzące z tych chimer analizowano pod kątem pochodzenia dawcy lub gospodarza za pomocą antygenów H-2 specyficznych względem szczepu i linii komórkowych za pomocą szeregu innych specyficznych markerów. Wykazano, że 75-95% komórek zrębowych jest komórkami hematopoetycznymi linii monocytów-makrofagów, w oparciu o pochodzenie dawcy, fagocytozę i ekspresję specyficznych hematopoetycznych antygenów powierzchniowych. Continue reading „Mikrośrodowisko hematopoetyczne. Geneza, linia i przeszczepialność komórek zrębu w długoterminowych hodowlach szpiku kostnego od myszy chimerycznych.”

Tłumienie mysiego zapalenia nerek NZB / NZW przez podanie syngenicznego przeciwciała monoklonalnego przeciwko DNA. Możliwa rola przeciwciał antyidiotypowych.

Zahamowanie krążących przeciwciał przeciw dwuniciowemu DNA osiągnięto u samic myszy NZB / NZW f1 przez wielokrotne podawanie monoklonalnego przeciwciała IgG2a do DNA. Zgony z zapaleniem nerek były opóźnione; Odkładanie kłębuszkowe IgG i kationowych przeciwciał IgG DNA charakterystycznych dla mysiego toczniowego zapalenia nerek uległo zmniejszeniu. Ilości krążących przeciwciał przeciwko jednoniciowemu DNA nie były zmniejszone w porównaniu z myszami kontrolnymi nieleczonymi lub leczonymi IgG szpiczakiem IgG. Przeciwciała skierowane przeciw monoklonalnemu anty-DNA pojawiły się w krążeniu leczonych myszy po trzech inokulacjach idiotypu. Te przeciwciała nie reagowały z innym monoklonalnym anty-DNA tego samego allotypu. Continue reading „Tłumienie mysiego zapalenia nerek NZB / NZW przez podanie syngenicznego przeciwciała monoklonalnego przeciwko DNA. Możliwa rola przeciwciał antyidiotypowych.”

Klonowanie i regulacja ekspresji transportera mocznika nerkowego szczura (rUT2).

U ssaków mocznik jest głównym produktem końcowym metabolizmu azotu i odgrywa kluczową rolę w mechanizmie koncentracji moczu. Kumulacja moczu w rdzeniu nerkowym ma kluczowe znaczenie dla zdolności nerki do koncentracji moczu do osmolalności większej niż osoczowe. Regulacja wydalania i gromadzenia mocznika w rdzeniu nerkowym zależy od stanu czynnościowego wyspecjalizowanych wrażliwych na działanie floretyny transporterów mocznika. W celu zbadania tych transporterów i ich regulacji ekspresji wyizolowaliśmy cDNA, który koduje homolog szczura (rUT2) królika UT2 (You, G., CP Smith, Y. Kanai, W.- S. Continue reading „Klonowanie i regulacja ekspresji transportera mocznika nerkowego szczura (rUT2).”

Czynnik wzrostu hepatocytów jest najsilniejszym endogennym stymulantem proliferacji komórek nabłonkowych królika i migracji w pierwotnej hodowli.

Sugeruje się, że różne czynniki wzrostu biorą udział w naprawie błony śluzowej żołądka. Nasze poprzednie badania wykazały, że egzogenny czynnik wzrostu hepatocytów (HGF) ma działanie proliferacyjne na komórki nabłonka żołądka. W niniejszym badaniu porównanie maksymalnych efektów proliferacyjnych i optymalnych stężeń kilku czynników wzrostu wykazało, że HGF był najsilniejszym mitogenem dla komórek nabłonka żołądka, tak jak w przypadku hepatocytów. Restytucję monowarstwy komórek nabłonka żołądka oceniano za pomocą modelu restytucji okrągłej. HGF był najskuteczniejszym środkiem ułatwiającym restytucję nabłonka żołądka wśród badanych osób. Continue reading „Czynnik wzrostu hepatocytów jest najsilniejszym endogennym stymulantem proliferacji komórek nabłonkowych królika i migracji w pierwotnej hodowli.”

Trombina stymuluje uwalnianie aktywatora plazminogenu tkankowego z hodowanych ludzkich komórek śródbłonka.

Wpływ trombiny na uwalnianie tkankowego aktywatora plazminogenu z komórek śródbłonka badano w pierwotnych hodowlach komórek śródbłonka żyły pępkowej człowieka. Stężenie tkankowego aktywatora plazminogenu w kondycjonowanej pożywce mierzono za pomocą dwustopniowego testu radioimmunometrycznego. Dodanie wzrastających stężeń (0,01 do 10 U / ml) trombiny do konfluentnych hodowli dało nasycalny, zależny od dawki wzrost szybkości uwalniania tkankowego aktywatora plazminogenu. Sześciokrotny wzrost stężenia tkankowego aktywatora plazminogenu (od 2 do 12 ng / ml) nastąpił po dodaniu U / ml trombiny (8 X 10 (-9) M) do hodowli zawierających 5 X 10 (4) komórek / cm2. Zwiększone uwalnianie nie było obserwowane aż do 6 godzin po dodaniu trombiny, osiągało maksymalną szybkość 1,3 ng / ml na godzinę między 8 a 16 godzin, a następnie obniżało się do 0,52 ng / ml na godzinę po 16 godzinach. Continue reading „Trombina stymuluje uwalnianie aktywatora plazminogenu tkankowego z hodowanych ludzkich komórek śródbłonka.”

Stereoselektywna interakcja fenylobutazonu z [12C / 13C] pseudorationami warfaryny u człowieka

Aby ocenić interakcję fenylbutazonu z racemiczną warfaryną lub R, S – ((3) – warfaryną u człowieka, S – ((3) – warfarynę lub lewowarfarynę zsyntetyzowano z oznaczeniem 13C w pozycji 2 jądra kumaryny i dodano do [12C]. ] R (+) – warfaryna lub dekstrowarfaryna z wytworzeniem [12C / 13C] pseudo-akwareli warfaryny. U sześciu normalnych ludzi, pojedyncza doustna dawka tego leku jest oznaczana na zimno. pseudorakemię, 1,5 mg / kg masy ciała, podawano z i bez dziennej dawki fenylobutazonu, 300 mg doustnie, zaczynając 3 dni przed dawką warfaryny i kontynuując przez hypoprotrombinemię. Próbki osocza pobierano codziennie i analizowano pod kątem zawartości warfaryny i jednoetapowej aktywności protrombiny. Continue reading „Stereoselektywna interakcja fenylobutazonu z [12C / 13C] pseudorationami warfaryny u człowieka”

Krytyczna rola żelaza w oddziaływaniach gospodarz-bakteria.

Zdolność potencjalnych patogenów do pozyskiwania żelaza u gospodarza jest ważnym wyznacznikiem zarówno zjadliwości, jak i charakteru wytwarzanej infekcji. Wirulentne bakterie Gram-ujemne są zdolne do pozyskania wystarczającej ilości żelaza od gospodarza, ponieważ ich zjadliwość (w przypadku zarodków kurcząt) nie ma wpływu na egzogenne żelazo. Avirulentne mutanty, które najwyraźniej mają ograniczoną zdolność do pozyskiwania żelaza, można wyizolować z wirulentnych szczepów. Śmiertelność tych mutantów została znacznie zwiększona przez egzogenne żelazo. Zmniejszenie względnie wysokiego nasycenia żelaza kurcząt (do poziomów bardziej zbliżonych do tych u ludzi) poprzez wstępne traktowanie białkami wiążącymi żelazo lub endotoksyną hamuje letalność niektórych zjadliwych bakterii. Continue reading „Krytyczna rola żelaza w oddziaływaniach gospodarz-bakteria.”

Wpływ eksperymentalnego niedoboru insuliny na wydzielanie glukagonu

Tłumienie trzustkowego wydzielania glukagonu przez hiperglikemię jest cechą normalnej funkcji komórki alfa. Jednak u osób z cukrzycą glukagon w osoczu jest prawidłowy lub wysoki pomimo hiperglikemii. Wydawało się, że obecność glukozy lub jej metabolitów w komórce alfa może być niezbędna do zahamowania wydzielania glukagonu, a także, że w cukrzycy niedobór wewnątrzpochodowy glukozy wtórnej do niedoboru insuliny może być odpowiedzialny za niedopuszczalność. Niniejsze badanie zaprojektowano w celu określenia wpływu na wydzielanie glukagonu przez blokadę metabolizmu glukozy i doświadczalnego niedoboru insuliny. Blokada metabolizmu glukozy została wywołana u psów przez podanie 2-deoksyglukozy lub mannoheptulozy. Continue reading „Wpływ eksperymentalnego niedoboru insuliny na wydzielanie glukagonu”

Wzbogacanie diety kwasem wielonienasyconym kwasu eikozapentaenowego zapobiega białkomoczowi i przedłuża przeżycie u myszy NZB x NZW F1.

Prostaglandyny i związki pokrewne są aktywnymi mediatorami zapalenia, ale dane dotyczące ich roli w patogenezie kłębuszkowego zapalenia nerek u myszy F1 rasy nowozelandzkiej Black x New Zealand White (NZB x NZW) są sprzeczne. Wykazano, że dietetyczny kwas eikozapentaenowy (EPA, C20: 5), analog kwasu tłuszczowego z kwasu arachidonowego (C20: 4) pogarsza agregację płytek u ludzi, prawdopodobnie poprzez hamowanie syntezy prostaglandyn i tromboksanów z kwasu arachidonowego. Podajemy tutaj wpływ diety wysokiej w EPA na rozwój choroby nerek i przeżywalność u samic myszy NZB x NZW F1. Zwierzęta w wieku 4-5 tygodni karmiono dietami zawierającymi 25% lipidów, dostarczanych albo w łusce wołowej albo w oleju z menhadenu, przy analizie kwasów tłuszczowych, odpowiednio, poniżej 0,05 i 14,4% EPA. W pierwszym eksperymencie, o 13.5 mo wieku, myszy na diecie z łojem wołowym miały wszystkie (9/9) rozwinięte białkomocz i większość (6/9) zmarła, z nerkowym histologicznym badaniem ujawniającym ciężkie kłębuszkowe zapalenie nerek. Continue reading „Wzbogacanie diety kwasem wielonienasyconym kwasu eikozapentaenowego zapobiega białkomoczowi i przedłuża przeżycie u myszy NZB x NZW F1.”