Interakcja monocytów z współhodowlami komórek ściany aorty ludzkiej obejmuje interleukiny 1 i 6 z wyraźnym wzrostem sygnału koneksyny43.

Pożywka z współhodowli ludzkich komórek śródbłonka aorty (HAEC) i komórek mięśni gładkich (HASMC) pobranych od tego samego dawcy zawierała około dwa do czterech razy więcej czynnika stymulującego kolonię makrofagów, czynnik stymulujący kolonię granulocytów / makrofagów i do 5,1 razy więcej transformującego czynnika wzrostu beta, niż można by przypisać sumowaniu aktywności pożywek z równoważnej liczby HAEC i HASMC hodowanych osobno. Po znakowaniu impulsowym stwierdzono, że immunoprecypitowane [35S] fibronektyny i [14C] kolagenu są znacznie zwiększone w kulturach kohaktycznych w porównaniu z hodowlą HAEC i HASMC oddzielnie. Współdziałanie HAEC i HASMC skutkowało 2,7-krotnym wzrostem poziomu informacyjnego RNA koneksyny43. Gdy bezpośredni kontakt fizyczny między HAEC i HASMC został uniemożliwiony przez membranę, która była przepuszczalna dla pożywki, poziomy [35S] fibronektyny i [14C] kolagenu w kokulturze były znacznie zmniejszone. Monocyty hodowane same zawierały niski poziom [35S] fibronektyny i [14C] kolagenu, ale po dodaniu do kokultury dochodziło do 22-krotnego wzrostu [35S] fibronektyny i 1,9-krotnego wzrostu kolagenu [14C] w porównaniu do tylko sama kokultura. Continue reading „Interakcja monocytów z współhodowlami komórek ściany aorty ludzkiej obejmuje interleukiny 1 i 6 z wyraźnym wzrostem sygnału koneksyny43.”

Identyfikacja in vivo ujemnego elementu regulatorowego w mysim genie reninowym przy użyciu bezpośredniego transferu genu.

Mysz DBA / 2J zawiera dwa loci genu reninowego (Ren1d i Ren2d). Ren2d, ale nie Ren1d, jest wyrażany w gruczole podżuchwowym (SMG), podczas gdy oba są wyrażane w nerce. Na podstawie badań in vitro postulowaliśmy, że negatywny element regulatorowy (NRE) w promotorze genu reniny jest zaangażowany w jego specyficzną dla tkanki ekspresję. W tym badaniu zbadaliśmy mechanizm molekularny na poziomie in vivo przy użyciu bezpośredniego transferu genów. Fragmenty promotora Ren1d lub Ren2d zostały połączone z genem ekspresji genu acetylotransferazy chloramfenikolu (CAT). Continue reading „Identyfikacja in vivo ujemnego elementu regulatorowego w mysim genie reninowym przy użyciu bezpośredniego transferu genu.”

Charakterystyka swoistych właściwości fibrynolitycznych pro-urokinazy poprzez badanie zmutowanych form opornych na plazminę wytwarzanych przez mutagenezę swoistą dla miejsca lizyny (158).

Dwie oporne na plazminę zmutowane postacie pro-urokinazy (pro-UK) skonstruowane przez ukierunkowaną mutagenezę Lys158 do Val158 i Met158 zostały użyte do oceny wewnętrznych właściwości enzymatycznych i fibrynolitycznych prowansji Wielkiej Brytanii w odróżnieniu od właściwości jego dwułańcuchowego łańcucha Pochodna brytyjska (TC-UK). Obydwa mutanty, chociaż odporne na aktywację plazminą, były tak wrażliwe jak prowansjańskie na degradację przez trombinę. Ponieważ trombina rozszczepia wiązanie peptydowe tylko dwóch reszt z miejsca aktywacji, integralność tej pętli była zachowana w dwóch mutantach. Amidolityczne i aktywujące plazminogen aktywności mutantów wynosiły odpowiednio 0,14 i 0,12% aktywności TC-UK. Aktywność fibryny wynosiła 2400 IU / ml i 700 IU / mg dla mutantów Met158 i Val158 lub około 1,5% dla TC-UK. Continue reading „Charakterystyka swoistych właściwości fibrynolitycznych pro-urokinazy poprzez badanie zmutowanych form opornych na plazminę wytwarzanych przez mutagenezę swoistą dla miejsca lizyny (158).”

Wtrętowa peroksydacja lipidów in vivo u szczurów z chronicznym przeciążeniem żelazem.

Peroksydacyjny rozkład lipidów błony komórkowej jest postulowanym mechanizmem uszkodzenia hepatocytów w przeciążeniu żelazem miąższowym. W niniejszym badaniu poszukiwaliśmy bezpośredniego dowodu peroksydacji lipidów in vivo (mierzonego przez tworzenie dienów sprzężonych z lipidami w wątrobowych błonach organelli) od szczurów z doświadczalnym przewlekłym obciążeniem żelazem. Zarówno pozajelitowe podawanie nitrylotrioctanu żelazowego (FeNTA), jak i suplementację diety karbonylową żelazem zastosowano do wytworzenia przewlekłego nadmiaru żelaza. Biochemiczna i histologiczna ocena tkanki wątroby potwierdziła umiarkowany wzrost zawartości żelaza w wątrobie. Podawanie FeNTA powodowało nadmierne odkładanie żelaza w wątrobowym zraziku zarówno w hepatocytach, jak iw komórkach Kupffera, podczas gdy suplementacja diety karbonylkiem żelaza powodowała większe przeciążenie żelazem wątrobowym w periportalnej dystrybucji z odkładaniem żelaza głównie w hepatocytach. Continue reading „Wtrętowa peroksydacja lipidów in vivo u szczurów z chronicznym przeciążeniem żelazem.”

Manometria normalnego górnego zwieracza przełyku i jej zmiany w laryngektomii

Raporty o szybkim przepływie normalnego górnego zwieracza przełyku (UES) badano równocześnie z konwencjonalną sondą półprzewodnikową Honeywell o trzech otworach, ośmioma światłem sondą promieniowo perfuzowaną (RP) i zaprojektowaną sondą czułości obwodowej (CS) do pomiaru ciśnienia UES (UESP) bez względu na orientację sondy. Krzywe ciśnienia poddano digitalizacji i analizowano komputerowo. Sonda Honeywell zanotowała znacznie niższe wartości szczytowe niż pozostałe dwie metody i miała szerokie różnice ciśnienia wewnątrzpodstawowego (średni współczynnik zmienności, 53%). Przeciwnie, UESP mierzony za pomocą sondy CS był stały dla każdego osobnika (średni pik UESP, 121 mm Hg, średni współczynnik zmienności, 15%). Sonda RP z przedporoderem była UESP identyczna z ciśnieniem w sondach CS. Continue reading „Manometria normalnego górnego zwieracza przełyku i jej zmiany w laryngektomii”

Wpływ rozszerzenia objętości na hemodynamikę nerek nerki poddanej zabiegowi operacyjnemu

Hemodynamikę nerki szczura badano podczas redukcji ciśnienia tętniczego nerki do 35-40 mm Hg (H), a po zwiększeniu objętości pod tym ciśnieniem 0,9% NaCl (IS), 1,7% NaCl (HS), 5% mannitolu w 0,9% NaCl (MS), 5% mannitol w wodzie (MW) lub 50 mM mannitol + 125 mM NaCl. W czasie H przepływ lewy nerkowy (RBF) wynosił 0,8 . 0,1 ml / min. Ekspansja z IS nie zmieniła RBF, ale ekspansja z HS, MS, MW i 50 + 125 mM NaCl podniosła RBF do 200-250% wartości hipoperfuzji. Krzepkowe ciśnienie kapilarne znacznie wzrosło z 15,7-0,7 mm Hg podczas H do 22,3. Continue reading „Wpływ rozszerzenia objętości na hemodynamikę nerek nerki poddanej zabiegowi operacyjnemu”

Brak ekspresji aminoacylazy-1 w drobnokomórkowym raku płuca. Dowody na inaktywację genów kodowanych przez chromosom 3p.

Delecja z udziałem chromosomu 3p (14-23) charakterystycznie występuje w drobnokomórkowym raku płuca (SCLC). Redukcja do homozygotyczności, a nie całkowita utrata, jest typowo obserwowana dla genów w usuniętym regionie. Brak ekspresji genów kodowanych przez ten region, co oznacza dezaktywację wszystkich alleli, nie został wcześniej opisany. Zbadaliśmy ekspresję aminoacylazy-1 (ACY-1), kodowanej przez chromosom 3p21, przy użyciu zarówno testu aktywności elektroforetycznej, jak i testu ELISA opartego na przeciwciałach monoklonalnych. Różne tkanki ludzkie, w tym płuca, mózg, wątroba, nerki, serce, rdzeń nadnerczy i erytrocyty były uprzednio badane pod kątem aktywności ACY-1 i antygenu; wszystkie oprócz erytrocytów są pozytywne. Continue reading „Brak ekspresji aminoacylazy-1 w drobnokomórkowym raku płuca. Dowody na inaktywację genów kodowanych przez chromosom 3p.”

Wpływ stymulacji współczulnej i substancji wazoaktywnych na żyły płucne psa.

Wkład płucnych żył płatkowych w zwiększenie oporu naczyniowego płuc w odpowiedzi na stymulację układu współczulnego badano w warunkach kontrolowanego przepływu krwi u znieczulonego psa, w którym mierzono ciśnienia naczyniowe jednocześnie w perfundowanej tętnicy lobaryjnej, dopływowej żyle lobarowej 2- 3 mm średnicy i w lewym przedsionku. Stymulacja zwojów gwiaździstych w 3, 10 i 30 cyklach / s zwiększonego ciśnienia w tętnicy płatowej i małej żyle w sposób związany z bodźcem, ale zmniejszone ciśnienie w lewym przedsionku. Wstrzyknięcie norepinefryny do perfundowanej tętnicy lobarowej również zwiększyło ciśnienie w tętnicy lobarskiej i małych żyłach, ale zmniejszyło ciśnienie w lewym przedsionku. Zwiększenie ciśnienia tętniczego i żylnego w odpowiedzi na wstrzykniętą norepinefrynę lub na stymulację nerwów było antagonizowane przez czynnik blokujący receptor alfa. Wzrost ciśnienia zarówno w tętnicy robo- czej, jak iw małej żyle, przy stymulacji nerwów, ale bez podania noradrenaliny, był hamowany przez adrenergiczny czynnik blokujący terminal nerwowy. Continue reading „Wpływ stymulacji współczulnej i substancji wazoaktywnych na żyły płucne psa.”

Dr (a-) polimorfizm rozpadu czynnika przyspieszającego. Charakterystyka biochemiczna, funkcjonalna i molekularna oraz produkcja allelospecyficznych transfektantów.

Antygen Dra należy do systemu grup krwi związanych z Cromer, serii antygenów na czynnik przyspieszający rozkład (DAF), zakotwiczonego w błonie białka glikozylo-fosfatydyloinozytolu, który chroni komórki gospodarza przed uszkodzeniami, w których pośredniczy dopełniacz. Przeanalizowaliśmy rzadki dziedziczny fenotyp dr (a-), aby ustalić powiązane zmiany biochemiczne i funkcjonalne w DAF oraz scharakteryzować podstawę tego polimorfizmu. Test radioimmunologiczny i cytometria przepływowa erytrocytów Dr (a-) wykazały 40% normalnej ekspresji powierzchniowej DAF, ale normalne poziomy kilku innych zakotwiczonych białek glikozylo-fosfatydyloinozytolu, odróżniając ten fenotyp od napadowej nocnej hemoglobinurii. Western blot potwierdził tę zmniejszoną ekspresję DAF i wykazał nieco szybszą ruchliwość cząsteczki na SDS-PAGE. Pomimo zmniejszonej ekspresji DAF, erytrocyty Dr (a-) funkcjonowały normalnie w teście wrażliwości na lizę dopełniacza. Continue reading „Dr (a-) polimorfizm rozpadu czynnika przyspieszającego. Charakterystyka biochemiczna, funkcjonalna i molekularna oraz produkcja allelospecyficznych transfektantów.”

Hamowanie odkładania kolagenu w macierzy pozakomórkowej zapobiega tworzeniu zrąb wspomagających hematopoezę w długotrwałych hodowlach szpiku kostnego myszy.

Długoterminowa produkcja mysich komórek krwiotwórczych in vitro zależy od ustalenia złożonego mikrośrodowiska składającego się z różnych komórek zrębowych i rozległej macierzy pozakomórkowej, która obejmuje kolagen, fibronektynę, lamininę, proteoglikany i inne niezdefiniowane składniki przylegające do płytek hodowlanych. Cis-4-hydroksyprolinę (CHP), względnie specyficzny inhibitor wydzielania kolagenu, zastosowano do zbadania roli pozakomórkowego odkładania kolagenu we wspomaganiu hematopoezy w długotrwałych hodowlach komórek szpiku kostnego myszy C57B1 / 6J. Przez cały 10-tygodniowy okres hodowli wszystkie naczynia hodowlane zawierały 0, 10, 25 lub 50 mikrogramów / ml CHP. Wszystkie komórki średnie i nieprzylegające były usuwane w tygodniowych odstępach i zastępowane świeżą pożywką zawierającą wcześniejsze stężenia CHP. Komórki nieadherentne badano co tydzień dla komórek całkowitych i komórek progenitorowych pluripotencjalnych, erytroidalnych, megakariocytarnych i granulocytowo-makrofagowych. Continue reading „Hamowanie odkładania kolagenu w macierzy pozakomórkowej zapobiega tworzeniu zrąb wspomagających hematopoezę w długotrwałych hodowlach szpiku kostnego myszy.”