Rola diestrów forbolu w tworzeniu kolonii mysich megakariocytów in vitro.

Różnicowanie megakariocytów in vitro jest regulowane przez dwie aktywności: aktywność stymulującą kolonię megakariocytów (Mk-CSA), która jest wymagana do proliferacji, oraz czynnik pomocniczy, aktywność wzmacniającą megakariocytów, która odgrywa rolę w późniejszych zdarzeniach różnicowania. Nowotworowe estry forbolu zmieniają wiele związanych z różnicowaniem komórek. W związku z tym wysunięto hipotezę, że estry forbolu mogą powodować różnicowanie megakariocytów in vitro. 4-octan beta-Phorbolu z 12-mirystynianem (PMA), w którym współhodowano ze źródłem Mk-CSA, stymulował trzykrotny wzrost liczby kolonii. Wspólna hodowla PMA i aktywność potencjatora megakariocytów nie stymulowała tworzenia kolonii, eliminując w ten sposób jakiekolwiek działanie PMA jako Mk-CSA. Continue reading „Rola diestrów forbolu w tworzeniu kolonii mysich megakariocytów in vitro.”

Dowody na dwa różne tryby zniknięcia tripeptydów w jelicie człowieka. Pobieranie przez układy nośników peptydowych i hydroliza przez hydrolazy peptydowe.

Jelitowy los dwóch tripeptydów (triglicyny i trileucyny), które różnią się znacznie pod względem rozpuszczalności i ciężaru cząsteczkowego, badano przez perfuzję jelita czczego u zdrowych ludzkich ochotników. Szybkość pobierania glicyny lub leucyny z badanych roztworów zawierających triglicycynę lub trileucynę była większa niż z roztworów testowych zawierających odpowiednie ilości wolnej glicyny lub wolnej leucyny, odpowiednio. Szybkość pobierania glicyny ze 100 mM roztworu triglicyny była większa niż w przypadku 150 mM roztworu diglicyny. Przy każdym podawanym w infuzji ładunku triglicyny (np. 1000 mumol / min) częstości (mikromole / minuty na 30 cm) zaniku triglicyny (810 +/- 40) lub wchłaniania glicyny (2208 +/- 122) były znacznie większe niż współczynniki akumulacji luminalnej diglicyny (56 +/- 10) lub wolnej glicyny (110 +/- 18). Continue reading „Dowody na dwa różne tryby zniknięcia tripeptydów w jelicie człowieka. Pobieranie przez układy nośników peptydowych i hydroliza przez hydrolazy peptydowe.”

Niskie dawki interferonu alfa powodują bardziej skuteczną aktywację komórek NK.

W celu zdefiniowania krytycznych parametrów dotyczących interferonu (IFN) w komórkach naturalnych zabójców (NK) in vivo, dawkowaliśmy pacjentom z rakiem seryjne cotygodniowe domięśniowe iniekcje oczyszczonego limfoblastoidalnego IFN w sześciu dawkach w zakresie od 10 (5) do 3 X 10 (7) U. Ustalono sekwencję dawek poprzez losowe przydzielanie pacjentów do jednego z sześciu poziomów w schemacie uporządkowania kwadratów łacińskich. Stymulacja komórek NK, trzykrotny wzrost pików powyżej poziomu cytolizy przed iniekcją (P = 0,022), wystąpił w obwodowych komórkach jednojądrzastych (PMC) pobranych 24 h po iniekcji, 3 x 10 (6) U, ale nie był wykrywalny w żadnej dawce w PMC próbkowano 7 dni po wstrzyknięciu. Nie nastąpiło stępienie w odpowiedzi komórek NK na powtarzane wstrzykiwanie dawek IFN po raz drugi w lub kilka tygodni po zakończeniu badania. Przy dawkach IFN wynoszącej 3 X 10 (6), 10 (7) i 3 X 10 (7) U istniała ujemna korelacja między ilością wstrzykniętego IFN a średnim rozmiarem aktywacji komórek NK (r = -0,423, P mniej niż 0,05). Continue reading „Niskie dawki interferonu alfa powodują bardziej skuteczną aktywację komórek NK.”

Indukowana plazminą agregacja płytek i reakcja uwalniania płytek krwi. WPŁYW NA HEMOSTAZĘ

Aktywowana trypsyną plazmina świńska i ludzka plazmina aktywowana streptokinazą (SK) powodowała agregację zawiesiny przemytych płytek krwi ludzkiej, króliczej lub świńskiej. Agregacja płytek była odwracalna, ale towarzyszyło jej znaczące uwalnianie nukleotydów adeninowych, serotoniny i fibrynogenu płytkowego. W końcu strawiono fibrynogen płytkowy. Wpływ plazminy na płytki krwi był hamowany przez sojowy inhibitor trypsyny, kwas epsilon aminokapronowy, persantynę, prostaglandynę E1 i fenylobutazon. Krótkie traktowanie płytek krwi plazmidem zwiększyło ich wrażliwość na ADP; jednak ta czułość została utracona podczas dłuższej inkubacji z plazminą. Continue reading „Indukowana plazminą agregacja płytek i reakcja uwalniania płytek krwi. WPŁYW NA HEMOSTAZĘ”

Wzbogacanie diety kwasem wielonienasyconym kwasu eikozapentaenowego zapobiega białkomoczowi i przedłuża przeżycie u myszy NZB x NZW F1.

Prostaglandyny i związki pokrewne są aktywnymi mediatorami zapalenia, ale dane dotyczące ich roli w patogenezie kłębuszkowego zapalenia nerek u myszy F1 rasy nowozelandzkiej Black x New Zealand White (NZB x NZW) są sprzeczne. Wykazano, że dietetyczny kwas eikozapentaenowy (EPA, C20: 5), analog kwasu tłuszczowego z kwasu arachidonowego (C20: 4) pogarsza agregację płytek u ludzi, prawdopodobnie poprzez hamowanie syntezy prostaglandyn i tromboksanów z kwasu arachidonowego. Podajemy tutaj wpływ diety wysokiej w EPA na rozwój choroby nerek i przeżywalność u samic myszy NZB x NZW F1. Zwierzęta w wieku 4-5 tygodni karmiono dietami zawierającymi 25% lipidów, dostarczanych albo w łusce wołowej albo w oleju z menhadenu, przy analizie kwasów tłuszczowych, odpowiednio, poniżej 0,05 i 14,4% EPA. W pierwszym eksperymencie, o 13.5 mo wieku, myszy na diecie z łojem wołowym miały wszystkie (9/9) rozwinięte białkomocz i większość (6/9) zmarła, z nerkowym histologicznym badaniem ujawniającym ciężkie kłębuszkowe zapalenie nerek. Continue reading „Wzbogacanie diety kwasem wielonienasyconym kwasu eikozapentaenowego zapobiega białkomoczowi i przedłuża przeżycie u myszy NZB x NZW F1.”

Wpływ eksperymentalnego niedoboru insuliny na wydzielanie glukagonu

Tłumienie trzustkowego wydzielania glukagonu przez hiperglikemię jest cechą normalnej funkcji komórki alfa. Jednak u osób z cukrzycą glukagon w osoczu jest prawidłowy lub wysoki pomimo hiperglikemii. Wydawało się, że obecność glukozy lub jej metabolitów w komórce alfa może być niezbędna do zahamowania wydzielania glukagonu, a także, że w cukrzycy niedobór wewnątrzpochodowy glukozy wtórnej do niedoboru insuliny może być odpowiedzialny za niedopuszczalność. Niniejsze badanie zaprojektowano w celu określenia wpływu na wydzielanie glukagonu przez blokadę metabolizmu glukozy i doświadczalnego niedoboru insuliny. Blokada metabolizmu glukozy została wywołana u psów przez podanie 2-deoksyglukozy lub mannoheptulozy. Continue reading „Wpływ eksperymentalnego niedoboru insuliny na wydzielanie glukagonu”

Przeciwciało do reumatoidalnego zapalenia stawów Antygen jądrowy: JEJ ZWIĄZEK Z IN VIVO EPSTEIN-BARR ZAKAŻENIE WIRUSA

Większość pacjentów z seropozytywnym reumatoidalnym zapaleniem stawów i zmiennym, lecz mniejszym odsetkiem normalnych osobników, wytrąca przeciwciała przeciwko antygenowi jądrowemu, antygenowi jądrowemu reumatoidalnego zapalenia stawów, obecnemu w limfoblastoidalnych komórkach B limfocytów B Epstein-Barr. W badaniu pacjentów z mononukleozą zakaźną i zdrowych osób z grupy kontrolnej wykorzystaliśmy czuły test immunofluorescencji pośredniej na przeciwciała przeciwko reumatoidalnym antygenowi jądrowemu. Spośród 110 surowic od normalnych kadetów w wieku szkolnym 58 było od osób bez wcześniejszego zakażenia wirusem Epstein-Barr, o czym świadczy brak przeciwciał przeciwko wirusowemu antygenowi kapsydowemu. Wszystkie z nich również nie wykazywały aktywności wobec antygenu jądrowego reumatoidalnego zapalenia stawów. 52 surowice były dodatnie pod względem przeciwciał przeciwko wirusowemu antygenowi kapsydowemu, a przeciwciało przeciwko reumatoidalnym antygenowi jądrowemu występowało w 26 (50%) z nich. Continue reading „Przeciwciało do reumatoidalnego zapalenia stawów Antygen jądrowy: JEJ ZWIĄZEK Z IN VIVO EPSTEIN-BARR ZAKAŻENIE WIRUSA”

Stereoselektywna interakcja fenylobutazonu z [12C / 13C] pseudorationami warfaryny u człowieka

Aby ocenić interakcję fenylbutazonu z racemiczną warfaryną lub R, S – ((3) – warfaryną u człowieka, S – ((3) – warfarynę lub lewowarfarynę zsyntetyzowano z oznaczeniem 13C w pozycji 2 jądra kumaryny i dodano do [12C]. ] R (+) – warfaryna lub dekstrowarfaryna z wytworzeniem [12C / 13C] pseudo-akwareli warfaryny. U sześciu normalnych ludzi, pojedyncza doustna dawka tego leku jest oznaczana na zimno. pseudorakemię, 1,5 mg / kg masy ciała, podawano z i bez dziennej dawki fenylobutazonu, 300 mg doustnie, zaczynając 3 dni przed dawką warfaryny i kontynuując przez hypoprotrombinemię. Próbki osocza pobierano codziennie i analizowano pod kątem zawartości warfaryny i jednoetapowej aktywności protrombiny. Continue reading „Stereoselektywna interakcja fenylobutazonu z [12C / 13C] pseudorationami warfaryny u człowieka”

Trombina stymuluje uwalnianie aktywatora plazminogenu tkankowego z hodowanych ludzkich komórek śródbłonka.

Wpływ trombiny na uwalnianie tkankowego aktywatora plazminogenu z komórek śródbłonka badano w pierwotnych hodowlach komórek śródbłonka żyły pępkowej człowieka. Stężenie tkankowego aktywatora plazminogenu w kondycjonowanej pożywce mierzono za pomocą dwustopniowego testu radioimmunometrycznego. Dodanie wzrastających stężeń (0,01 do 10 U / ml) trombiny do konfluentnych hodowli dało nasycalny, zależny od dawki wzrost szybkości uwalniania tkankowego aktywatora plazminogenu. Sześciokrotny wzrost stężenia tkankowego aktywatora plazminogenu (od 2 do 12 ng / ml) nastąpił po dodaniu U / ml trombiny (8 X 10 (-9) M) do hodowli zawierających 5 X 10 (4) komórek / cm2. Zwiększone uwalnianie nie było obserwowane aż do 6 godzin po dodaniu trombiny, osiągało maksymalną szybkość 1,3 ng / ml na godzinę między 8 a 16 godzin, a następnie obniżało się do 0,52 ng / ml na godzinę po 16 godzinach. Continue reading „Trombina stymuluje uwalnianie aktywatora plazminogenu tkankowego z hodowanych ludzkich komórek śródbłonka.”

Funkcja receptora czynnika wzrostu I w komórkach przysadki jest hamowana przez dominujący negatywny mutant.

Hybrydowe receptory badano w komórkach przysadki mózgowej szczura z nadekspresją receptorów ludzkiego typu dzikiego typu 950Tyr (WT) lub insulinopodobnego czynnika wzrostu (IGF-I) lub zmutowanych ludzkich receptorów IGF-I skróconych w pozycji 952 w regionie transbłonowym podjednostki beta (952STOP ). Wiązanie 125I-IGF-I było zwiększone zarówno w 950Tyr (WT) (14-krotnie) i skróconym ludzkim opornym transfektorem ludzkiego IGF-1 (952STOP) (50-krotnie), w porównaniu do nietransfekowanych komórek, które zawierały endogenne szczurze receptory IGF-I szczura . Znakowanie komórek metabolicznych, a następnie immunoprecypitacja monoklonalnymi przeciwciałami podjednostkowymi alfa i beta ujawniły obecność hybrydowych szczurzych / skróconych ludzkich receptorów, skróconych transfekowanych ludzkich receptorów i holotetramerów ludzkiego WT IGF-I. Oba zmutowane i hybrydowe receptory ulegały degradacji wolniej niż receptory 950Tyr (WT) (> 16 h). Pomimo znacznie zwiększonego wiązania liganda i przedłużonego okresu półtrwania receptora, transfektanty 952STOP nie przekazywały sygnału IGF-I w celu stłumienia hormonu wzrostu (GH). Continue reading „Funkcja receptora czynnika wzrostu I w komórkach przysadki jest hamowana przez dominujący negatywny mutant.”